碧云天生物技术pCMV-C-mOrange2说明书

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pCMV-C-mOrange2 (橙色荧光蛋白)

产品编号

D2625-1µg

D2625-100µg

产品名称

pCMV-C-mOrange2

(

橙色荧光蛋白

)

pCMV-C-mOrange2

(

橙色荧光蛋白

)

包装

1µg

100µg

产品简介：

 pCMV-C-mOrange2是碧云天自行研发的哺乳动物细胞表达质粒，用于表达C端含mOrange2标签的融合蛋白。mOrange2蛋白

是一种极其明亮的桔色荧光蛋白，与mOrange蛋白相比，其蛋白稳定性得以提高。

 pCMV-C-mOrange2含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。pCMV-C-mOrange2在多克隆位点的后面有一

个mOrange2的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有mOrange2标签的融合蛋白。

利用mOrange2的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位，也可以利用mOrange2抗体来检测或免疫

沉淀融合蛋白。mOrange2与GFP没有序列同源性，不能使用GFP抗体检测mOrange2，但可以尝试使用抗mcherry的抗体检测

mOrange2。

 pCMV-C-mOrange2为卡那霉

素抗性，并且含有Neomycin筛选标记，转染

细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的

细胞株。

 pCMV-C-mOrange2质粒的主要信息如下：

Position

Feature Nucleotide

CMV promoter 1-602

620-639

T3 promoter and T3 primer binding site

Multiple cloning site 651-740

741-1448

mOrange2

1498-1519

T7 promoter and T7 primer binding site

1531-1914

SV40 polyA signal

2052-2356

f1 origin of ss-DNA replication

2381-2505

bla promoter

2525-2863

SV40 promoter

2898-3689

Neomycin/kanamycin resistance ORF

3690-4148

HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal

4277-4944

pUC origin

 pCMV-C-mOrange2质粒(4996bp)的图谱如下：

 pCMV-C-mOrange2的多克隆位点的详细图谱如下：

SmaI

SacI SacII NotI XmaI BamHI HindIII

0651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG CCGCTCTAGC CCGGGCGGAT CCAAGCTTCT

CTCGAGGTGG CGCCACCGCC GGCGAGATCG GGCCCGCCTA GGTTCGAAGA

EcoRI EcoRV SalI XhoI XbaI mOrange2

0701 GCAGGAATTC GATATCGTCG ACAGATCTCT CGAGTCTAGA ATGTCTAAGG

CGTCCTTAAG CTATAGCAGC TGTCTAGAGA GCTCAGATCT TACAGATTCC

0751 GAGAAGAAAA TAATATGGCT ATCATCAAGG AATTTATGCG TTTTAAGGTC

CTCTTCTTTT ATTATACCGA TAGTAGTTCC TTAAATACGC AAAATTCCAG

0801 CGTATGGAAG GTTCAGTCAA TGGTCACGAA TTTGAAATTG AAGGTGAAGG

GCATACCTTC CAAGTCAGTT ACCAGTGCTT AAACTTTAAC TTCCACTTCC

0851 AGAAGGTCGT CCATACGAAG GTTTTCAAAC TGCTAAATTG AAGGTAACCA

TCTTCCAGCA GGTATGCTTC CAAAAGTTTG ACGATTTAAC TTCCATTGGT

0901 AAGGTGGACC ATTACCTTTT GCATGGGATA TTTTGTCACC ACAGTTTACA

TTCCACCTGG TAATGGAAAA CGTACCCTAT AAAACAGTGG TGTCAAATGT

0951 TACGGAAGTA AAGCATATGT TAAGCATCCA GCTGATATTC CTGATTACTT

ATGCCTTCAT TTCGTATACA ATTCGTAGGT CGACTATAAG GACTAATGAA

1001 TAAATTGAGT TTTCCTGAAG GTTTTAAATG GGAACGTGTC ATGAATTTTG

ATTTAACTCA AAAGGACTTC CAAAATTTAC CCTTGCACAG TACTTAAAAC

1051 AAGATGGTGG AGTTGTCACC GTAACACAAG ATTCTTCATT GCAGGATGGA

TTCTACCACC TCAACAGTGG CATTGTGTTC TAAGAAGTAA CGTCCTACCT

1101 GAATTTATCT ACAAGGTTAA ATTGCGTGGA ACCAATTTTC CATCTGATGG

CTTAAATAGA TGTTCCAATT TAACGCACCT TGGTTAAAAG GTAGACTACC

1151 TCCTGTCATG CAAAAGAAAA CAATGGGTTG GGAAGCAAGT TCTGAACGTA

AGGACAGTAC GTTTTCTTTT GTTACCCAAC CCTTCGTTCA AGACTTGCAT

1201 TGTACCCTGA AGATGGAGCC CTTAAAGGTG AAATCAAGAT GCGTTTGAAA

ACATGGGACT TCTACCTCGG GAATTTCCAC TTTAGTTCTA CGCAAACTTT

1251 CTTAAGGATG GTGGACATTA CACTTCTGAA GTCAAGACAA CTTACAAGGC

GAATTCCTAC CACCTGTAAT GTGAAGACTT CAGTTCTGTT GAATGTTCCG

1301 CAAAAAGCCA GTACAGCTTC CTGGAGCTTA CATCGTTGGT ATCAAATTGG

GTTTTTCGGT CATGTCGAAG GACCTCGAAT GTAGCAACCA TAGTTTAACC

1351 ATATTACATC ACACAATGAA GATTACACTA TCGTTGAACA ATATGAACGT

TATAATGTAG TGTGTTACTT CTAATGTGAT AGCAACTTGT TATACTTGCA

ApaI

1401 GCAGAAGGTC GTCACTCTAC TGGTGGTATG GATGAACTTT ACAAGTAAG G

CGTCTTCCAG CAGTGAGATG ACCACCATAC CTACTTGAAA TGTTCATTC C

1451 GGGCCCGGTA CCTTAATTAA TTAAGGTACC

CCCGGGCCAT GGAATTAATT AATTCCATGG



pCMV-C-mOrange2中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-mOrange2)包括：

AclI AfeI AgeI AhdI AscI AsiSI

BcgI BlpI BmgBI Bpu10I BsiWI BsmBI

BsrGI BssHII BstZ17I EarI EcoNI Esp3I

PmeI PmlI PpuMI PshAI PspXI SapI

SgrAI SpeI SwaI XcmI



pCMV-C-mOrange2中的单酶切位点（Restriction enzymes that cut pCMV-C-mOrange2 once）包括：

A’CGCG,T

GT’MK,AC 718

MluI AccI

TGG|CCA

C’TTAA,G 1251

MscI AflII

GG’CG,CC

CACNN|NNGTG 661

NarI AleI

G,GGCC’C G’CTAG,C

1453

NheI ApaI

G’TGCA,C

4630

NotI

GC’GGCC,GC

ApaLI

,N)

5

’(N)

10

ACNNNNGTAYC(N)

7

,(N)

5

’

1185

PaeR7I

C’TCGA,G

BaeI

G’GATC,C 687

PciI

A’CATGT

BamHI

2 / 4 D2625 pCMV-C-mOrange2(橙色荧光蛋白)

BbsI

BspEI

FseI

SbfI

1914

3108

3026

597

668

729

4944

400-1683301/800-8283301 碧云天/Beyotime

CCAN,NNN’NTGG

T’GATC,A 1685

PflFI BclI

G,GCGC’C

A’GATC,T 723

PflMI BglII

G,GCGC’C

G,CTAG’C 601

PluTI BmtI

GGTCTCN’NNNN, 4015

PspOMI

G’GGCC,C

BsaI

,NNN’(N)

9

AC(N)

5

CTCC(N)

7

,NNN’ 2078

PstI

C’TGCA,G

BsaXI

CG,AT’CG

GAGGAG(N)

8

,NN’ 2844

PvuI BseRI

CG’GWC,CG

GTGCAG(N)

14

,NN’ 1420

RsrII BsgI

G,AGCT’C

AT’CG,AT 2866

SacI BspDI

TT’CG,AA 3708

SacII

CC,GC’GG

BstBI

893

SalI

G’TCGA,C

BstEII

G’GTNAC,C

CCAN,NNNN’NTGG 663

SfiI

GGCCN,NNN’NGGCC

BstXI

GCAGTG,NN’ 1867

SfoI

GGC|GCC

BtsI

AT’CG,AT 2866

SmaI

CCC|GGG

ClaI

,NN’(N)

11

CAA(N)

5

GTGG(N)

10

,NN’ 382

SnaBI

TAC|GTA

CspCI

2144

SrfI

GCCC|GGGC

DraIII

CAC,NNN’GTG

653

StuI

AGG|CCT

Eco53kI

GAG|CTC

G’AATT,C

705

TspMI

C’CCGG,G

EcoRI

GAT|ATC

713

Tth111I

GACN’N,NGTC

EcoRV

693

XbaI

T’CTAG,A

HindIII

A’AGCT,T

CC,TGCA`GG 1791

XhoI

C’TCGA,G

HpaI

G’GCGC,C 3025

XmaI

C’CCGG,G

KasI

C’AATT,G 1778

XmnI

GAANN|NNTTC

MfeI



pCMV-C-mOrange2质粒中推荐使用的测序引物序列如下：

T3 primer (620-639): 5'-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3'

C-mOrange2 primer (852-873): 5'- AACCTTCGTATGGACGACCTTC -3'

 pCMV-C-mOrange2的全序列信息请参考碧云天的网站上该质粒的信息。

 pCMV-C-mOrange2质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。

图1. pCMV-C-mOrange2质粒转染HEK293T细胞后的表达效果图。左侧为明场照片，右侧为荧光照片。

3144

1146

3029

1449

703

1531

3524

655

662

717

2801

3027

682

346

682

2847

680

3144

735

729

680

871

包装清单：

产品编号

D2625-1µg

D2625-100µg

—

产品名称

pCMV-C-mOrange2

(

橙色荧光蛋白

)

pCMV-C-mOrange2

(橙

色荧光蛋白

)

说明书

包装

1µg

100µg

1份

保存条件：

-20ºC保存。

注意事项：

本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：

1. 首次使用1µg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提

获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。

碧云天/Beyotime 400-1683301/800-8283301 D2625 pCMV-C-mOrange2 (橙色荧光蛋白) 3 / 4

2. 100µg包装的本产品质粒浓度为0.1µg/µl，共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。

3. pCMV-C-mOrange2质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，构建的质粒可以用常规方法转染细胞。

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产品编号

D2602-1µg

D2602-100µg

D2621-1µg

D2621-100µg

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D2623-100µg

D2624-1µg

D2624-100µg

D2626-1µg

D2626-100µg

D2628-1µg

D2628-100µg

D2630-1µg

D2630-100µg

D2632-1µg

D2632-100µg

D2639-1µg

D2639-100µg

D2650-1µg

D2650-100µg

D2672-1µg

D2672-100µg

D2701-1µg

D2701-100µg

D2703-1µg

D2703-100µg

D2705-1µg

D2705-100µg

D2707-1µg

D2707-100µg

D2711-1µg

D2711-100µg

D2713-1µg

D2713-100µg

D2716-1µg

D2716-100µg

D2722-1µg

D2722-100µg

D2733-1µg

D2733-100µg

D2737-1µg

D2737-100µg

D2756-1µg

D2756-100µg

产品名称

pCMV-Blank

pCMV-Blank

pCMV-C-BFP (蓝色荧光蛋白)

pCMV-C-BFP (蓝色荧光蛋白)

pCMV-C-CFP (青色荧光蛋白)

pCMV-C-CFP (青色荧光蛋白)

pCMV-C-DsRed (红色荧光蛋白)

pCMV-C-DsRed (红色荧光蛋白)

pCMV-C-EGFP (绿色荧光蛋白)

pCMV-C-EGFP (绿色荧光蛋白)

pCMV-C-mCherry (红色荧光蛋白)

pCMV-C-mCherry (红色荧光蛋白)

pCMV-C-YFP (黄色荧光蛋白)

pCMV-C-YFP (黄色荧光蛋白)

pCMV-C-Flag

pCMV-C-Flag

pCMV-C-HA

pCMV-C-HA

pCMV-C-His

pCMV-C-His

pCMV-C-Myc

pCMV-C-Myc

pCMV-N-BFP (蓝色荧光蛋白)

pCMV-N-BFP (蓝色荧光蛋白)

pCMV-N-CFP (青色荧光蛋白)

pCMV-N-CFP (青色荧光蛋白)

pCMV-N-DsRed (红色荧光蛋白)

pCMV-N-DsRed (红色荧光蛋白)

pCMV-N-EGFP (绿色荧光蛋白)

pCMV-N-EGFP (绿色荧光蛋白)

pCMV-N-mCherry (红色荧光蛋白)

pCMV-N-mCherry (红色荧光蛋白)

pCMV-N-mOrange2(橙色荧光蛋白)

pCMV-N-mOrange2 (橙色荧光蛋白)

pCMV-N-YFP (黄色荧光蛋白)

pCMV-N-YFP (黄色荧光蛋白)

pCMV-N-Flag

pCMV-N-Flag

pCMV-N-HA

pCMV-N-HA

pCMV-N-His

pCMV-N-His

pCMV-N-Myc

pCMV-N-Myc

包装

1µg

100µg

1µg

100µg

1µg

100µg

1µg

100µg

1µg

100µg

1µg

100µg

1µg

100µg

1µg

100µg

1µg

100µg

1µg

100µg

1µg

100µg

1µg

100µg

1µg

100µg

1µg

100µg

1µg

100µg

1µg

100µg

1µg

100µg

1µg

100µg

1µg

100µg

1µg

100µg

1µg

100µg

1µg

100µg

Version 2020.04.23

4 / 4 D2625 pCMV-C-mOrange2(橙色荧光蛋白) 400-1683301/800-8283301 碧云天/Beyotime