两品种兔皮肤Shh基因的表达规律研究

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2024年7月18日发(作者：)

第３３卷第４期　

ｄｏｉ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．２０９５—３８８７．２０１３．０４．００１　

遗传育种　５　

一　遗传　．　

÷　

两品种兔皮肤Ｓｈｈ基因的表达规律研究　

（１．安徽省农业科学院畜牧兽医研究所，合肥

３．扬州大学动物科学与技术学院，江苏

２３００３１；　

育种　？　孙露露ｔ，ｚ．ｓ，黄冬维・，陈胜ｔ，吴信生ｚ　，赵辉玲－　

２．江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室，扬州　２２５００９；　

２２５００９）　

摘要：采用实时荧光定量ＰＣＲ技术研究Ｓｈｈ基因在皖系长毛兔和比利时兔不同周龄皮肤中的表达　

规律，结果表明：Ｓｈｈ基因在两个兔品种中的表达规律并不完全一致，但均在毛生长旺盛期表达量　

相对较高。Ｓｈｈ基因在皖系长毛兔Ｏ～２２周龄中的表达量均相对较高，在比利时兔中０－６周龄时表　

达量相对较高，８～２２周龄时表达量较低。由此推测Ｓｈｈ基因与家兔毛生长相关。　

关键词：皖系长毛兔；比利时兔；Ｓｈｈ基因；实时荧光定量ＰＣＲ；表达　

中图分类号：￥８２９．１　文献标志码：Ａ　文章编号：２０９５—３８８７（２０１３）０４—０００５—０４　

Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｓｋｉｎ　Ｓｈｈ　Ｇｅｎｅ　ｉｎ　Ｔｗｏ　Ｒａｂｂｉｔ　Ｂｒｅｅｄｓ　

Ｓｕｎ　Ｌｕ－ｌｕ　’　，Ｈｕａｎｇ　Ｄｏｎｇ－ｗｅｉ　，Ｚｈａｏ　Ｈｕｉ－ｌｉｎｇ　，ｅｔ　ａｌ　

（１．Ａｎｈｕｉ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ａｎｉｍａｌ　ａｎｄ　Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｈｅｆｅｉ　２３００３　１，Ｃｈｉｎａ；　

２．Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ａｎｉｍａｌ　Ｈｅｒｅｄｉｔｙ　Ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ａｎｄ　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｄｅｓｉｇｎｉｎｇ，Ｙａｎｇｚｈｏｕ　２２５００９，Ｃｈｉｎａ；　

３．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ａｎｉｍａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｙａｎｇｚｈｏｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉａｎｇｓｕ　２２５００９，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ，ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ　ｏｆ　ｓｋｉｎ　Ｓｈｈ　ｇｅｎｅ　ｉｎ　ｔｗｏ　ｒａｂｂｉｔ　ｂｒｅｅｄｓ（Ｗａｎ　ｓｔｒａｉｎ　Ａｎｇｏｒａ　ｒａｂｂｉｔ　ａｎｄ　Ｂｅｌｇｉｕｍ　ｒａｂｂｉｔ）　

ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｗｅｅｋｓ　ｏｆ　ａｇｅ　ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄｉｅｄ　ｂｙ　ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ＰＣＲ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ　ｏｆ　

Ｓｈｈ　ｇｅｎｅ　ｉｎ　ｔｗｏ　ｒａｂｂｉｔ　ｂｒｅｅｄｓ　ｗｅｒｅ　ｎｏｔ　ｅｎｔｉｒｅｌｙ　ｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔ，ｂｕｔ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ　ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｐｅｒｉｏｄｓ　ｏｆ　ｈａｉｒ　ｗｅｒｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅｌｙ　

ｈｉｇｈ；ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　Ｓｈｈ　ｇｅｎｅ　ｗａｓ　ｈｉｇｈ　ｉｎ　Ｗａｎ　ｓｔｒａｉｎ　Ａｎｇｏｒａ　ｒａｂｂｉｔ　ａｔ　ｔｈｅ　ａｇｅ　ｏｆ　０－２２　ｗｅｅｋ，ｂｕｔ　ｉｔ　ｗａｓ　ｌｏｗ　ｉｎ　ｔｈｅ　

Ｂｅｌｇｉａｎ　ｒａｂｂｉｔ　ａｔ　ｔｈｅ　ａｇｅ　ｏｆ　８－２２　ｗｅｅｋ．Ｔｈｅｓｅ　ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　Ｓｈｈ　ｇｅｎｅ　ｗａｓ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｒａｂｂｉｔ　ｈａｉｒ　

ｇｒｏｗｔｈ．　

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｗａｎ　ｓｔｒａｉｎ　Ａｎｇｏｒａ　ｒａｂｂｉｔ；Ｂｅｌｇｉｕｍ　ｒａｂｂｉｔ；Ｓｈｈ　ｇｅｎｅ；ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ＰＣＲ；ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　

Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路是与毛囊生长期相关的信号通　

路之一，Ｈｅｄｇｅｈｏｇ蛋白的编码基因有Ｓｈｈ、Ｉｈｈ和Ｄｈｈ基　

长毛兔原名安哥拉兔，起源于小亚细亚一带，１７２３　

年由英国引进到法国，随后分布于世界各地，过去主要　

有英、德、法和中４个不同的品种。德系长毛兔引入我国　

后，主要用于改良中系长毛兔，在提高我国长毛兔产毛　

量和改进兔毛品质方面发挥了重要作用。目前，我国长　

毛兔养殖数量占世界的９０％，兔毛产量占世界的９５％以　

因，其中Ｓｈｈ是Ｈｅｄｇｅｈｏｇ蛋白的主要编码基因，Ｓｈｈ参　

与调控毛囊生长和毛囊休止期向生长期转换的过程。　

Ｓｈｈ基因的功能受到Ｐａｔｃｈｅｄ［１　和Ｓｍｏｏｔｈｅｎｅｄ［２　两种跨膜　

蛋白的调节，Ｐａｔｃｈｅｄ蛋白既可以作为Ｓｈｈ配体的受体，　

也可以作为Ｓｍｏｏｔｈｅｎｅｄ蛋白的负调控因子。Ｓｈｈ前体蛋　

白经过剪切与修饰形成１９　ｋＤａ　Ｎ端蛋白和２５　ｋＤａ　Ｃ端　

上　。皖系长毛兔（Ｗａｎ　ｓｔｒａｉｎ　Ａｎｇｏｒａ　Ｒａｂｂｉｔ）是安徽省农　

业科学院畜牧兽医研究所历经２０余年的系统选育而成，　

于２０１０年７月顺利通过国家畜禽遗传资源委员会新品　

蛋白，Ｃ端蛋白可以将胆固醇分子转移到Ｓｈｈ　Ｎ端蛋白　

的ｃ端，从而使Ｎ端蛋白的作用区域得到有效控制　｝４］。　种审定，并于当年获颁国家级畜禽新品种证书。皖系长　

毛兔的被毛特征是：全身绒毛厚密、洁白、光亮。被毛有　

晦蔼　：２０１３￣５　０　

毛丛结构，但不缠结，有明显波浪形弯曲。多有额毛，部　

业科技成果转化资金　

。　

基金项昏　国家兔产短援术体寨　

颈强≮　、ＩＧＢ２Ｅ３￣ＩＯ　

分有颊毛，耳背有稀疏短毛，耳尖有一撮长毛。四肢、腹　

信者筒舜：孙露露（ｉ９８６－ｉ；￣　硕士研究生≮　

通讯作者：赵辉玲（ｔ９６５．）研究员。主要　

部密生绒毛；体毛细长柔软，排列整齐，全身枪毛稀少。　

割　与繁殖韧　

比利时兔又称巨灰兔、弗朗德巨兔，是英国育种家用原　

６　中国草食动物科学　２０１３焦　

产于比利时贝韦伦一带的野生穴兔改良育成的优良肉　

用兔。比利时兔被毛呈黄褐色或栗壳色，毛尖略带黑色，　

腹部灰白，两眼周围有不规则的白圈，耳尖部有黑色光　

亮的毛边，比利时兔被毛坚韧性较好，毛色具有天然光　

泽，皮张面积大，皮板的弹性和柔性好。　

目前相关研究证明Ｓｈｈ基因参与毛囊生长发育相关　

过程，但是对Ｓｈｈ基因的研究主要集中在人和鼠上，至今　

还无该基因在家兔上的相关研究。因此本试验以皖系长　

毛兔和比利时兔为试验材料，研究Ｓｈｈ基因在其皮肤组　

织中的表达规律，旨在初步探究该基因的表达情况与兔　

毛生长的相关性。　

１材料与方法　

１．１材料　

皖系长毛兔和比利时兔的皮肤组织样均采自安徽省　

农科院种兔场，对母兔同期配种，同期产仔，所产仔兔饲　

养在同一环境条件下，分别在０、２、４、６、８、１０、１２、１４、　

１６、１８、２０、２２周龄每个品种选择健康公、母兔各３只，　

采集体侧部和臀部皮肤各２　ｇ左右，投入液氮中，后转　

入一７０　ｃｃ冰箱中保存备用。　

１．２仪器与试剂　

Ａｇｉｌｅｎｔ安捷伦９３０８８２　Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ　ＩＩ１　ＳＹＢＲ，ＲＮＡ提取　

试剂盒（Ｔｒｉｚｏ１）购自Ｌｉｆｅ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ公司；ＤＥＰＣ和琼脂　

糖购白ＳＩＧＭＡ公司；ＦａｓｔＱｕａｎｔ　ＲＴ　Ｋｉｔ（Ｗｉｔｈ　ｇＤＮａｓｅ）购　

自北京天根生化科技有限公司；荧光定量试剂盒　

（ＤＲＲ０８１Ａ）购自大连ＴａＫａＲａ公司；主要仪器包括Ａｇｉ—　

ｌｅｎｔ安捷伦ＭＸ３０００Ｐ荧光定量仪器，制冰机购自ＳＭ公　

司，超低温冰箱购自日本ＳＡＮＹ公司，ＮａｎｏＤｒｏＰ　ＮＤ一　

１０００浓度测定仪购自美国ＧＥ公司，ＥＰＰｅｎｄｏｒｆｆ　Ｔｈｅｒｍａｌ　

ＣｙｃｌｅｒＰＣＲ仪购自德国ＥＰＰｅｎｄｏｒｆ公司。　

ｌ＿３方法　

１．３．１　引物的设计与合成　根据ＧｅｎＢａｎｋ中家兔　

ＧＡＰＤＨ和Ｓｈｈ基因的ｃＤＮＡ序列，利用Ｐｒｉｍｅｒ３．０设计　

两个基因的特异性荧光定量引物，引物由上海生物工程　

公司合成，引物序列见表１。　

表１实时荧光定量ＰＣＲ引物序列　

茎固鱼整　曼！塑壁型　丛　Ｐ　

ＧＡＰＤＨ　Ｆ：５’—．ＴＣＡＣＣＡＴＣＴＴＣＣＡＧＧＡＧＣＧＡ一３’２９３　

Ｒ：５’一ＣＡＣＡＡＴＧＣＣＧＡＡＧＴＧＧＴＣＧＴ一３’　

Ｓｈｈ　Ｆ：５’一ＣＧＧＣＡＣＧＡＡＧＣＴＧＧＴＧＡＡＡＧＡ一３’　１０３　

Ｒ：５’一ＧＣＧＡＴＣＣＡＧＧＡＡＧＧＴＧＡＧＧＡＡＧＴ一３’　

１．３＿２　ＲＮＡ的提取与质量检测本试验采用Ｔｒｉｚｏｌ法从皖　

系长毛兔和比利时兔体侧部和臀部的皮肤中提取总ＲＮＡ。　

利用１％的琼脂糖凝胶电泳检测样本总ＲＮＡ的完整　

性，并用ＮａｎｏＤｒｏｐ　ＮＤ一１０００浓度测定仪测定ＲＮＡ浓　

度，最终将每个ＲＮＡ样本取出一部分稀释至１００　ｎｇ／ｔｘＬ，　

放人一７０℃冰箱中保存。　

１．３－３　ＲＮＡ的反转录　利用ＦａｓｔＱｕａｎｔ　ＲＴ　Ｋｉｔ（Ｗｉｔｈ　

ｇＤＮａｓｅ）（￣京天根生化科技有限公司）将上述皖系长毛　

兔和比利时兔各个周龄体侧部和臀部的ＲＮＡ反转录合　

成ｃＤＮＡ，按试剂盒进行反转录操作。　

１．３－４实时荧光定量　实时荧光定量ＰＣＲ试验２０　

体系：上游引物１　，下游引物１　，模板ｅＤＮＡ　１　Ｌ，　

ＳＹＢＲ　Ｐｒｅｍｉｘ　１０　，双蒸水７　。反应程序为：９５℃预变　

性１０ｍｉｎ；９５％变性２０　Ｓ，５８℃退火３０　Ｓ，７２ｃ《＝延伸２５　Ｓ，共　

４５个循环；９５ｏＣ　１　ｍｉｎ，５５ｏＣ　３０　Ｓ，９５ｏＣ　３０　Ｓ。　

１．３．５数据统计分析方法实时荧光定量ＰＣＲ数据分　

析，先用ＥＸＣＥＬ初步处理Ｓｈｈ基因的实时荧光定量　

ＰＣＲ数据，相对定量的结果采用２　算法哺　进行处理　

（ＡａＣｔ＝（待测组目的基因平均　值一待测组管家基因平　

均　值）一（对照组目的基因平均　一对照组管家基因平　

均　值））。　

２结果与分析　

２．１　ＲＮＡ琼脂糖电泳结果　

１％琼脂糖凝胶检测总ＲＮＡ的完整性，核酸蛋白测　

定仪测定浓度，稀释至１００　ｎｇ／￣Ｌ，一７０￣Ｃ保存备用。由图　

１可知，提取的ＲＮＡ　２８Ｓ、１８Ｓ条带清晰，无明显降解。　

２８Ｓ　

ｌ８Ｓ　

图１　ＲＮＡ电泳图　

２．２　Ｓｈｈ基因在皖系长毛兔中的表达规律　

以０周龄皖系长毛兔公兔臀部中Ｓｈｈ的表达量为内　

对照，采用２一　法计算Ｓｈｈ基因在皖系长毛兔不同性　

别、不同周龄、不同部位中的相对表达量。由图２可见，　

Ｓｈｈ基因在皖系长毛兔的整个生长发育过程中均有一定　

量的表达，除公兔体侧部外，其它均在０～２周龄呈上升　

趋势。母兔体侧部在４、８周龄的相对表达量较高，母兔臀　

部１８周龄明显上调；１０、１４和ｌ８周龄公兔臀部Ｓｈｈ基　

因表达也较高，呈波动性，公兔体侧部０、１８和２２周龄　

Ｓｈｈ基因表达较高。公兔体侧部在０和２２周龄的表达变　

化趋势与其他３组不同，表现为０—４周龄下降，２０～２２周　

第３３卷第４期　遗传育种　７　

龄上升的趋势。母兔体侧部在２～１２周龄的变化趋势不　

同于其他３组，呈现“上升一下降一上升一下降一上升”　

的趋势。除４周龄和８周龄外，公兔体侧部的相对表达量　

显著高于其他３组，１８周龄时，母兔臀部和公兔体侧部　

显著高于另外两组，其他组中，公母之间或者部位之间　

均差异不显著（Ｐ＞０．０５　ｏ　

４．０　

３．５　

删２．５　

２．０　

１．５　

１．０　

０．５　

０．０　

周龄　

图２　Ｓｈｈ基因在皖系长毛兔中的表达规律　

２．３　Ｓｈｈ基因在比利时兔中的表达规律　

以０周龄比利时公兔臀部中Ｓｈｈ的表达量为内对照，　

采用２－￣ｃｔ法计算Ｓｈｈ基因在比利时兔不同性别、不同周　

龄、不同部位中的相对表达量。由图３可见，Ｓｈｈ基因在　

比利时兔不同周龄、不同性别、不同部位中相对表达量　

变化趋势基本一致，除公兔臀部０～４周龄呈现先下降再　

上升的趋势外，其他均表现为０～２周龄上升，２～８周龄下　

降，８～２２周龄表达量相对较低，且变化幅度较小。　

皿ⅢＩｊ　

霞　

周龄　

图３　Ｓｈｈ基因在比利时兔中的表达规律　

３讨论　

Ｈｅｄｇｅｈｏｇ蛋白的编码基因有Ｓｈｈ、　和Ｄｈｈ基因，　

其中Ｓｈｈ是Ｈｅｄｇｅｈｏｇ蛋白的主要编码基因，Ｓｈｈ参与调　

控毛囊生长和毛囊休止期向生长期转换的过程【７］。Ｓｈｈ是　

毛囊在胚胎期时形态发生的必要信号分子，如果小鼠发　

生肌　基因突变，则不会出现皮肤上皮内陷，从而阻断胚　

胎期毛囊形态的发生。Ｍｉｌｌ等喁　通过皮下注射的方式，给　

１９日龄Ｃ５７ＢＬ／６的小鼠注射腺病毒载体Ｓｈｈ，发现注射　

Ｓｈｈ处皮肤中Ｓｈｈ表达量增加，并刺激了处于休止期的　

毛囊加速进入生长期，２周后发现小鼠注射处皮肤新生　

毛发的速度比非注射处皮肤新生毛发速度快。据研究发　

现　参与内皮细胞的增殖、修复过程　，Ｓｏｎｇ等ｎ。将环　

杷明（Ｓｈｈ的阻断剂）注射到小鼠胚胎中，发现明显影响　

了小鼠的血管细胞的增殖、分化。苏蕊等Ⅲ　分析了Ｓｈｈ基　

因在内蒙古绒山羊皮肤毛囊发育生长期和休止期皮肤　

中的表达，结果显示：休止期的Ｓｈｈ基因表达水平是生长　

期的０．２２倍。　

本研究中Ｓｈｈ基因在皖系长毛兔和比利时兔０周龄　

时均有一定的表达量，说明该基因在家兔胚胎期就开始　

表达，但是Ｓｈｈ基因在两个兔品种中的表达变化趋势并　

不完全一致，此结果可能是两个兔品种的经济用途不同　

导致的。除皖系长毛兔公兔体侧和比利时兔母兔臀部，　

其他６组在０－２周龄，Ｓｈｈ基因的表达量均呈现上升趋　

势，吴添文［１　的研究表明：０周龄时，初级毛囊周围分布　

的次级毛囊数量较少，２周龄时，次级毛囊的数量明显上　

升，亚毛囊群中的次级毛囊数普遍为５～１２个，即０－２周　

龄时，家兔的毛囊处于一个快速生长期，这与本研究的　

结果一致，说明Ｓｈｈ基因在毛囊生长旺盛期表达量相对　

较高。Ｓｈｈ基因在皖系长毛兔０～２２周龄的表达量均相对　

较高，比利时兔０－６周龄时表达量相对较高，８～２２周龄　

表达量相对较低且变化趋势较为平缓。皖系长毛兔为毛　

用型兔，其被毛生长较快且在整个生命过程均在生长，　

但比利时兔为肉用型兔，其被毛长到一定阶段，便开始　

缓慢生长，甚至停止生长。本研究结果发现Ｓｈｈ基因在比　

利时兔８—２２周龄表达量相对较低，这可能是其毛发生　

长缓慢的原因。　

４结论　

Ｓｈｈ基因在皖系长毛兔和比利时兔两个品种中的表　

达规律并不完全一致，但均在毛生长旺盛期表达量相对　

较高。Ｓｈｈ基因在皖系长毛兔各个周龄中表达量均相对　

较高，而在比利时兔中８～２２周龄时表达量较低。由此推　

测Ｓｈｈ基因与家兔毛发生长相关。　

参考文献　

ｌ　１　ｊＳｍｕｋｌｅｒ　Ｓ　Ｒ，Ｒｕｎｃｉｍａｎ　Ｓ　Ｂ，Ｘｕ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｅｍｂ￣ｏｎｉｃ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ａｓｓｕｍｅ　

ａ　ｐｒｉｍｉｔｉｖｅ　ｎｅｕｒａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌ　ｆａｔｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ａｂｓｅｎｃｅ　ｏｆ　ｅｘｔｉｒｎｓｉｃ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ　

［Ｊ］．Ｊ　Ｃｅｌｌ　Ｂｉｏｌ，２００６，１７２（１）：７９—９０．　

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［３］Ｂｕｍｃｒｏｔ　Ｄ　Ａ，Ｔａｋａｄａ　Ｒ，ＭｃＭａｈｏｎ　Ａ　Ｐ．Ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｅ　ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　ｙｉｅｌｄｓ　

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１４］Ｋｅｌｌｅｙ　Ｒ　Ｌ，Ｒｏｅｓｓｌｅｒ　Ｅ，Ｈｅｎｎｅｋａｍ　Ｒ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．Ｈｏｌｏｐｒｏｓｅｎｃｅｐｈａｌｙ　ｉｎ　

ＲＳＩ－ｌ／Ｓｍｉｔｈ－Ｌｅｍｌｉ￣）ｐｉｔｚ　ｓｙｎｄｒｏｍｅ：ｄｏｅｓ　ａｂｎｏｒｍａｌ　ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　

ａｆｆｅｃｔ　ｔｈｅ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓｏｎｉｃ　Ｈｅｄｇｅｈｏｇ？［Ｊ］．Ａｍ　Ｊ　Ｍｅｄ　Ｇｅｎｅｔ，１９９６，６６　

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［５］陈胜，黄冬维，程广龙，等．国内长毛兔育种研究进展［Ｊ］．中国草食　

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８　

ｄｏｉ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．２０９５－３８８７．２０１３．０４．００２　

中国草食动物科学　２０１３正　

新疆马鹿群体遗传多样性及起源进化研究　

李秋艳　，邓铸疆　，任战军　，熊建杰　，王　乐　，王洪亮　

（１．新疆兵团第二师３３团，尉犁８４１５０５；　

２．西北农林科技大学动物科技学院，陕西杨陵　７１２１００）　

摘要：为了科学评价、保护和利用新疆马鹿遗传资源，检测新疆马鹿群体遗传多样性和确定新疆马　

鹿起源进化的系统地位。对新疆塔里木马鹿、阿尔泰马鹿、天山马鹿３个群体，及与其距离相近的　

阿拉善马鹿、甘肃马鹿２个群体共１０８个个体的Ｄ—ｌｏｏｐ全序列扩增、测序，分析其碱基组成及变　

异。结果：共检测到４０个单倍型，单倍型多样度（Ｈｄ）０．９９８＿＿．０．００６，核苷酸多样度（Ｐｉ）０．０４１＿＋０．００５，　

平均核苷酸差异数Ｋ＝３６．０８。构建ＮＪ和ＭＰ分子系统发育树发现，塔里木马鹿与其他马鹿遗传距　

离较远，分属于不同的类群；阿尔泰马鹿、天山马鹿及甘肃马鹿之间都存在基因交流情况，可能是　

群体间引种杂交所致。结论：新疆马鹿遗传多样性丰富，新疆塔里木马鹿可能起源于欧洲，其他马　

鹿起源于亚洲。部分群体间存在基因交流情况。　

关键词：马鹿；ｍｔＤＮＡ；Ｄ—ｌｏｏｐ；遗传多样性　

中图分类号：￥８２５．２　文献标志码：Ａ　文章编号：２０９５—３８８７（２０１３）０４—０００８—０４　

Ｇｅｎｅｔｉｃ　Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｏｒｉｇｉｎ　ａｎｄ　Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ　ｏｆＷａｐｉｔｉ（Ｒｅｄ　Ｄｅｅｒ）ｉｎ　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　

Ｌｉ　Ｑｉｕ－ｙａｎ　，Ｄｅｎｇ　Ｚｈｕ－ｊｉａｎｇ２，Ｒｅｎ　Ｚｈａｎ－ｊｕｎ２，ｅｔ　ａｌ　

（１．３３ｓｔ　Ｒｅｇｉｍｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　２ｎｄ　Ｄｉｖｉｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｘｉ￣ｉａｎｇ　Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ　Ｃｏｒｐｓ，Ｙｕｌｉ　Ｘｉ￣ｉａｎｇ　８４１５００，Ｃｈｉｎａ；　

２．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆＡｎｉｍａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ　Ａ＆Ｆ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ　Ｓｈａａｎｘｉ　７１２１００，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｅｘｐｌｏｒｅ　ｔｈｅ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ａｎｄ　ｃｌａｓｓｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ｓｔａｔｕｓ　ｏｆ　ｗａｐｉｔｉ（ｒｅｄ　ｄｅｅｒ）ｉｎ　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　ａｎｄ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ｔｈｅ　ｂａｓｉｓ　

ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｍａｔｅｒｉａｌｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｓｃｉｅｎｔｉｉｆｃ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒｅｄ　ｄｅｅｒ．ｔｈｅ　ｗｈｏｌｅ　Ｄ－ｌｏｏｐ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ（８９６—９９９　ｂｐ）ｏｆ　ｉｆｖｅ　

ｓｕｂｓｐｅｃｉｅｓ　ｗａｐｉｔｉ（Ｔａｌｉｍ　ｗａｐｉｔｉ，Ａｈａｉ　ｗａｐｉｔｉ，Ｔｉａｎｓｈａｎ　ｗａｐｉｔｉ，Ｇａｎｓｕ　ｗａｐｉｔｉ　ａｎｄ　Ａｌａｓｈａｎ　ｗａｐｉｔｉ）ｉｎ　１０８　ｓａｍｐｌｅｓ　ｗｅｒｅ　ａｍｐｌｉｉｆｅｄ　

ａｎｄ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｄ．ｔｈｅ　ｂａｓｅ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅｒｅ　ｗｅｒｅ　４０　ｄｉｆｆｅｒ—　

ｅｎｔ　ｈａｐｌｏｔｙｐｅｓ，ｔｈｅ　ｈａｐｌｏｔｙｐｅ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｈｄ）ｗａｓ　０．９９８￣０．００６，ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（ｐｉ）ｗａｓ　０．０４　１￣０．００５，Ａｖｅｒａｇｅ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　

ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｋ）ｗａｓ　３６．０８．Ｔｈｅ　ＮＪ　ａｎｄ　ＭＰ　ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｔｒｅｅ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　Ｔａｌｉｍ　ｗａｐｉｔｉ　ｈａｄ　ｆｕｒｔｈｅｒ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｓｔａｎｃｅ　ｗｉｔｈ　

收稿爨　｛２０ｌ３＿０４一ｍ　

｜　｜｜≈薯ｉ｜ｉ麓｜　誊薯　警＃誊　ｏｔｈｅｒ　ｓｕｂｓｐｅｃｉｅｓ，ｔｈｅｙ　ｓｈｏｕｌｄ　ｂｅ　ｃｌｕｓｔｅｒｅｄ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｗａｐｉｔｉ　

基金项馨　寓家称业羯珍　

甏事　

稀濒危动植物及栖息地　

槲　

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剿　拳舒　月　ｔｙｐｅｓ；ｔｈｅ　ｇｅｎｅ　ｅｘｃｈａｎｇｅ　ｗｅｒｅ　ｆｏｕｎｄ　ｉｎ　Ａｈａｉ　ｗａｐｉｔｉ，Ｔｉａｎｓｈａｎ　

ｗａｐｉｔｉ　ａｎｄ　Ｇａｎｓｕ　ｗａｐｉｔｉ，ｐｒｏｂａｂｌｙ　ｄｕｅ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ　ｃａｕｓｅｄ　

帮降雨旺梅。警ｂｙ　ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ．Ｉｔ　ｗａｓ　ｃｏｎｃｌｕｄｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅｒｅ　

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作者简介：　秋艳《ｆ９叫　

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遗讯惰者：往战军ｎ９６６．），　

鹗穗　啜，摄　鹎崭懿　

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［６］Ａｎｄｌ　Ｔ，Ｒｅｄｄｙ　Ｓ　Ｔ，ＧａｄｄａＰａｒａ　Ｔ，ｅｔ　ａ１．ＷＮＴ　ｓｉｎｇａｌｓ　ａｒｅ　ｒｅｑｕｉｒｅｄ　

ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｉｎｉｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈａｉｒ　ｆｏｌｌｉｃｌｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ［Ｊ］．Ｄｅｖ　Ｃｅｌｌ，２００２，　

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［９］尹雪，李新建，洪梅．Ｓｏｎｉｃ　Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路与内皮细胞功能的研　

究进展［Ｊ］．华中科技大学学报，２０１２，４１（４）：５０４—５０６．　

［ｔＯ］Ｓｏｎｇ　Ｌ，Ｌｉｕ　Ｙ，Ｙｕ　Ｙ，ｅｔ　ａ１．Ｓｈｈ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ｇｕｉｄｅｓ　ｓｐａｔｉａｌ　ｐａｔｈ—ｆｉｎｄｉｎｇ　

ｏｆ　ｒａｐｈｅｓｐｉｎａｌ　ｔｒａｃｔ　ａｘｏｎｓ　ｂｙ　ｍｕｈｉｄｉｒｅｃｔｉｏｎａｌ　ｒｅｐｕｌｓｉｏｎ　ｌ　Ｊ　Ｊ．Ｃｅｌｌ　

Ｒｅｓ，２０１２，２２（４）：６９７—７１６．　

［７］Ｗａｎｇ　Ｌ　ｃ，Ｌｉｕ　Ｚ　Ｙ，Ｇａｍｂａｒｄｅｌｌａ　Ｌ，ｅｔ　ａ１．Ｒｅｇｕｌａｒ　ａｒｔｉｃｌｅｓ：ｃｏｎｄｉｔｉｏｎａｌ　

ｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｅｄｇｅｈｏｇ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ｐａｔｈｗａｙ　ｄｅｆｉｎｅｓ　ｉｔ　ｓｅｒｉｔｉｅａｌ　ｒｏｌｅ　ｉｎ　ｈａｉｒ　

ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊ　Ｉｎｖｅｓｔ　Ｄｅｒｍａｔｏｌ，２０００，１　１４（５）：　

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［８］Ｍｉｌｌｓ　Ｊ，Ｎｉｅｗｍｉｅｒｚｙｃｋａ　Ａ，Ｏｌｏｕｍｉ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｃｒｉｔｉｃａｌ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｉｎｔｅ：ｇｎ‘ｎ—　

ｌｉｎｋｅｄ　ｋｉｎａｓｅ　ｉｎ　ｇｒａｎｕｌｅ　ｃｅｌｌ　ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｅｅｒｅｂｅｌｌａｒ　

［１２］吴添文．家兔毛囊发育规律及其相关基因的遗传效应、表达规律研　

究［Ｄ］．扬州：扬州大学，２０１１．　

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本文标签： 基因长毛兔表达